玉米脂肪酸值如何測(cè)定
在我們國(guó)家玉米是儲(chǔ)備糧的主要品種之一，玉米儲(chǔ)存品質(zhì)判定對(duì)我國(guó)糧食儲(chǔ)藏工作具有十分重要的指導(dǎo)意義?而脂肪酸值又是判定玉米儲(chǔ)存品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)?糧食中的脂肪酸值是脂肪在脂肪酶或酸堿作用下水解生成的?如果溫度較高，濕度較大，霉菌大量繁殖，脂肪水解速度則會(huì)加快，脂肪酸值也隨之增高?因此，通過脂肪酸值的測(cè)定，可以判斷糧食品質(zhì)的變化情況?國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T20570-2006）于2006年12月1日開始實(shí)施?標(biāo)準(zhǔn)中將脂肪酸值作為玉米儲(chǔ)存品質(zhì)判定的一項(xiàng)重要指標(biāo)，因此在玉米入庫及存儲(chǔ)過程中，脂肪酸值的測(cè)定都顯得尤為重要?由于玉米脂肪酸值測(cè)定過程中滴定終點(diǎn)變化不敏銳，個(gè)體差異大等問題，容易造成平行試驗(yàn)誤差較大?我們對(duì)該方法進(jìn)行仔細(xì)研究，總結(jié)了大量經(jīng)驗(yàn)，摸索出玉米脂肪酸值測(cè)定中應(yīng)注意的一些事項(xiàng)及終點(diǎn)判斷的輔助方法，大大減少了平行試驗(yàn)的誤差?
一?玉米脂肪酸值測(cè)定的方法
在室溫下用無水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，計(jì)算脂肪酸值?試樣制備→試樣稱取→浸出→過濾→滴定→結(jié)果計(jì)算?
二?影響測(cè)定結(jié)果的因素分析
1.樣品的制備?
1.1取樣要有代表性，分別取混合均勻的樣品80~100g?
1.2按GB/T5507檢驗(yàn)樣品細(xì)度，粉碎樣品只能用具有風(fēng)門可調(diào)和自清理功能的錘式旋風(fēng)磨粉碎，粉碎后的樣品一次通過CQl篩的應(yīng)達(dá)到95%以上?篩上篩下全部篩分范圍的樣品經(jīng)充分混合后裝入磨口瓶中備用?根據(jù)粉碎細(xì)度的要求，粉碎樣品只能選用錘式旋風(fēng)磨，一次粉碎達(dá)不到細(xì)度要求的，該錘式旋風(fēng)磨不能使用?
1.3粉碎樣品時(shí)，合理調(diào)節(jié)風(fēng)門，控制進(jìn)樣量，防止和減少出料管留存樣品，為避免出料管堵塞，減少磨膛發(fā)熱，引起樣品脂肪酸值的變化，每粉碎十個(gè)樣品應(yīng)將出料管拆下清理，待磨膛溫度常溫后再進(jìn)行樣品粉碎?
1.4在常溫下，粉碎后的樣品的脂肪酸值會(huì)逐漸增加，因此，必須及時(shí)進(jìn)行測(cè)定?全部過程不得超過24小時(shí)?如需較長(zhǎng)時(shí)間存放，應(yīng)存放在冰箱中?
2.樣品的處理?
2.1用50mL單標(biāo)線移液管移取50mL無水乙醇浸泡試樣，并置于振蕩頻率為100次/min的往返式振蕩器上振搖30min?
2.2振搖后將錐形瓶?jī)A斜靜置1~2min，讓試樣粉粒沉降在一角?
2.3用中速定性濾紙及短頸玻璃漏斗過濾，小心地傾倒盡可能多的上清液于鋪在玻璃漏斗上的多折濾紙中，用表面皿蓋在漏斗上，以減少蒸發(fā)，棄去最初幾滴濾液后，用50mL比色管收集濾液25mL以上?
3.滴定溶液的配置?
3.1氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制及標(biāo)定時(shí)注意的問題：第一?首先是KOH的稱�。褐档米⒁獾氖�，并不是所有的藥品都稱取28g，而是根據(jù)藥品的純度稱取不同的量?具體的計(jì)算公式為：稱取KOH的質(zhì)量m（g）=28/純度?例如：當(dāng)稱取的KOH純85%時(shí)，稱取KOH的質(zhì)量m（g）=28/85%=32.9g?這樣配制1000mLKOH儲(chǔ)備液時(shí)濃度會(huì)很接近0.5mol/L，另外一定純度的KOH使用時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)其純度會(huì)有不同程度下降，實(shí)際稱取量要比理論計(jì)算量略多，這樣才能保證配制的KOH儲(chǔ)備液濃度很接近0.5mol/L?
第二?KOH的溶解和稀釋：在標(biāo)準(zhǔn)（GB/T20570-2006）中，KOH用20mL無CO2蒸餾水溶解后用95%乙醇稀釋到1000mL保存?這是新舊標(biāo)準(zhǔn)明鮮的區(qū)別，一定要牢記，從理論上講，這種配制方法更合理，配制的濃度更準(zhǔn)確，因?yàn)橐欢w積的水（V1）和一定體積的95%乙醇（V2）混合時(shí)，其混合液的體積（V）總是小于V1+V2，所以當(dāng)用以水配制的儲(chǔ)備液稀釋0.01mol/L標(biāo)準(zhǔn)滴定液時(shí)，其實(shí)際濃度大于0.01mol/L，而用以95%乙醇配制的儲(chǔ)備液稀釋時(shí)，其實(shí)際濃度接近于0.01mol/L?
第三?儲(chǔ)備液的標(biāo)定：（1）基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀必須充分干燥，尤其在干燥器中冷卻時(shí)千萬不能吸水變潮，稱取的量應(yīng)盡量接近于2.04g，精確到0.0001g，這樣標(biāo)定的儲(chǔ)備液的濃度誤差小，而且接近于真實(shí)值，如果稱取的量與2.04g的差值越大，標(biāo)定出的儲(chǔ)備液濃度與真實(shí)值的差值越大，所以稱量時(shí)一定要注意?（2）氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液在常溫下（15℃~25℃）的保存時(shí)間不超過2個(gè)月，當(dāng)液體出現(xiàn)渾濁?沉淀?顏色變化等現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)重新制備?（3）0.01mol/LKOH標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制及使用中注意的問題：首先將稀釋用乙醇調(diào)至中性，先用標(biāo)好的儲(chǔ)備液配制少量0.01mol/LKOH溶液100mL，根據(jù)我們平時(shí)調(diào)校的結(jié)果，一般將20mL95%乙醇調(diào)至中性耗用0.01mol/LKOH的量為0.4-0.8mL，當(dāng)然這個(gè)量也并不是一成不變的，不同廠家不同生產(chǎn)批號(hào)的試劑會(huì)有不同的結(jié)果?這樣將1000mL95%乙醇調(diào)至中性耗用0.01mol/LKOH溶液的體積為1000/20×（0.4-0.8）=（20-40）mL?滴定用標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在臨用前稀釋配制，因?yàn)橐掖季哂腥踹�原性，易被氧化為乙酸而使標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度下降，所以滴定用標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在臨用前稀釋配制，配好的標(biāo)準(zhǔn)溶液使用的時(shí)間也不能太長(zhǎng)，一般最多三天，三天后還要用的話最好重新配制?制備溶液和往樣品中加無水乙醇前應(yīng)仔細(xì)觀察兩種試劑（95%乙醇和無水乙醇）的顏色，若有沉淀或試劑顏色發(fā)綠時(shí)則不能使用?
4.收集和移取濾液應(yīng)注意的問題?對(duì)提取液進(jìn)行過濾時(shí)必須濾去最初幾滴濾液，這樣做是為了潤(rùn)洗濾紙和漏斗，以消除濾紙和漏斗上含有的其它物質(zhì)對(duì)脂肪酸值的影響，過濾過程中在漏斗上加蓋濾紙，防止無水乙醇過快揮發(fā)而影響測(cè)定結(jié)果.收集濾液必須在25mL以上，最好收集在比色管中，以便有充足的濾液潤(rùn)洗移液管三次，同時(shí)保證測(cè)定用濾液的量達(dá)到25mL?若在其它器皿中收集，濾液的量不好掌握?
5.滴定?
5.1樣品提取后要盡快完成滴定，滴定應(yīng)在散射日光或日光型日光燈下對(duì)著光源方向進(jìn)行;滴定終點(diǎn)不易判斷時(shí)，可用加入不含CO2的蒸餾水后尚未滴定的提取液作參照，當(dāng)被滴定液顏色與參照液顏色相比有色差時(shí)，即可視為已到滴定終點(diǎn)?
5.2用移液管移取25mL濾液于150mL錐形瓶中，加入50mL不含CO2的蒸餾水?制備不含CO的蒸餾水時(shí)，要把蒸餾水煮沸10min左右，必須加蓋冷卻，否則CO2會(huì)重新進(jìn)入，影響脂肪酸值的測(cè)定，同時(shí)滴定多份樣品時(shí)也要注意及時(shí)蓋好裝蒸餾水燒杯，否則容易出現(xiàn)誤差?
5.3根據(jù)估計(jì)樣品消耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的量，選用適宜的微量滴定管滴定，并在使用前對(duì)微量滴定管進(jìn)行洗滌?檢漏和排除氣泡?
5.4提取?滴定過程的環(huán)境溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果影響很大，GB/T20570-2006規(guī)定提取滴定過程的環(huán)境溫度應(yīng)控制在15℃~25℃，如條件允許環(huán)境溫度應(yīng)控制在20℃左右?用于測(cè)定脂肪酸值的同一粉碎樣品，按GB5497中105℃恒重法測(cè)定樣品水分含量，計(jì)算脂肪酸值干基結(jié)果?此水分含量不得作為樣品水分含量結(jié)果報(bào)告?
5.5滴定時(shí)應(yīng)注意的問題滴定速度不能太快也不能太慢，太快反應(yīng)不充分，影響終點(diǎn)判定，太慢則會(huì)使測(cè)定結(jié)果偏高，更不能滴一下停一下，適宜的速度是開始時(shí)，標(biāo)液以點(diǎn)成線的速度流下，快到終點(diǎn)時(shí)一滴一滴的加入，必要時(shí)可半滴加入?
三?滴定終點(diǎn)的判斷
終點(diǎn)的判定是脂肪酸值測(cè)定中最關(guān)健的一個(gè)步驟，現(xiàn)向大家推薦兩種方法，第一種是過量滴定法，即用參照比色法判定終點(diǎn)，當(dāng)你認(rèn)為有色差但又不肯定時(shí)，先記下耗用標(biāo)液的體積數(shù)，再繼續(xù)往測(cè)定液中滴加標(biāo)液0.1-0.2mL，此時(shí)濾液的顏色若有明顯的變化，則說明前面你的判斷是正確的，若無變化或變化不明顯，則說明你前面的判斷是錯(cuò)誤的，立即記下此時(shí)耗用標(biāo)液的體積數(shù)，繼續(xù)滴加標(biāo)液0.1-0.2mL，觀察顏色變化?第二種方法是加水法，就是向你認(rèn)為已到終點(diǎn)但顏色變化不明顯的測(cè)定液中加入一定量的蒸餾水，一般為20mL左右，若濾液顏色有明顯變化，說明終點(diǎn)已到，若無變化說明末到終點(diǎn)，繼續(xù)滴加標(biāo)液直至顏色有變化?
以上是我們?cè)趯?shí)際工作中總結(jié)的一些操作經(jīng)驗(yàn)，在今后的檢測(cè)工作中，我們將不斷的拓寬知識(shí)視野，更新知識(shí)層面，提高檢測(cè)準(zhǔn)確度?
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