國產(chǎn)凱氏定氮儀法條件的研究
國產(chǎn)凱氏定氮儀法條件的研究
蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ),是構(gòu)成人體及動(dòng)、植物細(xì)胞組織的重要成分。飼料中蛋白質(zhì)測定有多種方法,如凱氏定氮法、酚試劑法、雙縮尿法及光度法等,F(xiàn)在,根據(jù)凱氏定氮法,又研究了定氮儀。在一般文獻(xiàn)中,很多都是采用國外進(jìn)口的定氮儀,但是進(jìn)口儀器價(jià)格昂貴,不適宜一般的實(shí)驗(yàn)室使用。本文主要是使用國產(chǎn)的蛋白質(zhì)測定儀,與國標(biāo)法比較,獲得了較為滿意的結(jié)果。
下面是我們在用粗蛋白測定儀測定氮含量時(shí)應(yīng)該注意的實(shí)驗(yàn)條件:1、反應(yīng)原理。兩種方法均為將含氮的有機(jī)化合物樣品經(jīng)過濃H2SO4和催化劑一同加熱消解,使蛋白質(zhì)分解,分解的氨與H2SO4結(jié)合生成(NH4)2SO4。然后堿化蒸餾使氨游離,氨經(jīng)H3BO3吸收后用H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),即為蛋白質(zhì)的含量。2、樣品用量與催化劑用量的選擇。當(dāng)稱量樣品量0.2~1.0g時(shí),消解、吸收效果最好,當(dāng)稱樣量大于1g時(shí)則消解、吸收效果不佳。CuSO4試劑用量分別稱取0.2g、0.5g、1.0g、1.5g、2.0g。實(shí)驗(yàn)測定證明1.5g,測定值符合要求。3、消解時(shí)間及消解溫度設(shè)置。不同的消解時(shí)間及相應(yīng)的溫度,加熱到400℃20分鐘的測定值與國標(biāo)法測定值接近。
蛋白質(zhì)含量的測定,在所有實(shí)驗(yàn)中是最為常見的,測定方法也多種多樣。但是至今,國家標(biāo)準(zhǔn)里還是規(guī)定凱氏定氮法為標(biāo)準(zhǔn)方法,而相應(yīng)的定氮儀就是最主要的測定儀器。