檢測蛋白質(zhì)常用的方法
【本文源自糧油儀器網(wǎng)】對動植物體內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測,我們是有著很多方法的,在這多種方法當中,我們需要采取比較常見的方便操作的方法進行,這時我們采取了使用儀器的方法——蛋白質(zhì)測定儀或者是全自動定氮儀,這樣的方式不但節(jié)省了工作時間,還提高了檢測的數(shù)據(jù)準確性。這種方法主要是利用動植物體內(nèi)的含氮量來測定蛋白質(zhì)含量的,其中也考慮到蛋白質(zhì)中特定氨基酸殘基、酸性和堿性基團以及芳香基團等測定蛋白質(zhì)含量。
蛋白質(zhì)測定常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的準確和操作簡便的方法之一,在國內(nèi)外應(yīng)用普遍。測定食品中蛋白質(zhì)的含量對于了解食品的質(zhì)量,合理膳食,保證不同人體的營養(yǎng)需要,掌握食品營養(yǎng)價值和品質(zhì)變化,對合理利用資源具有重要意義,同時為食品生產(chǎn)、加工等提供數(shù)據(jù)。將樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解,其中碳和氫被氧化為二氧化碳和水逸出,而樣品中的有機氮轉(zhuǎn)化為氨,并于硫酸結(jié)合形成硫酸銨,加堿將消化液堿化,通過水蒸氣蒸餾,使氨蒸出,用硼酸吸收形成硼酸銨,再以鹽酸或硫酸標準溶液滴定,根據(jù)標準酸消耗量可計算出蛋白質(zhì)的含量。
維護采場控頂范圍內(nèi)頂煤的穩(wěn)定使其不在架前和支架上方冒落,是放頂煤開采成敗的關(guān)鍵新鮮食品中的含氮化合物大多改寫以蛋白質(zhì)為主體,所以檢驗食品中蛋白質(zhì)時,往往測定總氮量,然后乘以蛋白質(zhì)換算系數(shù),即可得到蛋白質(zhì)的含量。
我們在進行試驗的時候,將濃硫酸和硫酸銅放在一起進行反應(yīng),出現(xiàn)的溶液是出現(xiàn)綠色的,因此硫酸銅除起催化劑作用外,還可以指示消化終點的到達,也就是說硫酸銅也是一種指示劑,為下一步的蒸餾作為堿性反應(yīng)的指示劑。首先向消化管中加硫酸鉀、硫酸銅,再向消化管中加入樣品樣品質(zhì)量,看樣品狀態(tài)而定,稱樣順序沒有要求。再加入濃硫酸一起放到消化爐上消化,加熱消化到消化管中的液體變?yōu)榱辆G色為止說明消化完全沒有損耗。 凱氏定氮儀中可用的催化劑種類很多,有氧化汞、汞、鋅粉等,但我們應(yīng)該考慮效果、價格及環(huán)境污染等多種因素,應(yīng)用廣泛的還是硫酸銅,有時常加入過氧化氫、次氯酸鉀等氧化劑以加速有機物的氧化分解。