碘蘭比色法測(cè)定精米中淀粉含量的步驟
測(cè)定精米直鏈淀粉含量有多種方法,經(jīng)我們的多年實(shí)踐,認(rèn)為簡(jiǎn)易碘蘭比色法具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確性較高的優(yōu)點(diǎn)。
一、原理
碘與直鏈淀粉和支鏈淀粉所形成的碘復(fù)合物具有不同的吸光特性。在pH為理。5一理。了的條件下,碘一直鏈淀粉復(fù)合物吸收600毫微米附近的紅橙光。反射490毫微米附近的蘭綠光。在光電比色計(jì)中通過(guò)620毫微米的單色紅光進(jìn)行比色,根據(jù)吸光系數(shù)(光密度)與直鏈淀粉含量濃度呈線性關(guān)系,故可將吸光系數(shù)轉(zhuǎn)換為精米直鏈淀粉含量。
二、儀器設(shè)備
。╨)出糙機(jī);(2)小型精米機(jī)(5一20克);(3)小型粉碎機(jī)(或UD氣旋粉碎器);(4)60目粉篩;(5)毫克天平;(6)100毫升容量瓶;(7)吸管(l一5毫升)或定量加液儀;(8)水浴鍋;(9)容量瓶架;(10)UV一120紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)或72型分光光度計(jì)。
三、試劑
試劑均要求分析純。(1)95%乙醉;(2)IN氫氧化鈉,;個(gè)用鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定(士5%);(3)IN醋酸;(4)0.2%碘液,稱取碘化鉀20克于功O毫升燒杯中,加入少量蒸餾水溶解,然后加人2克碘,待溶解后將個(gè)部溶液轉(zhuǎn)人100毫升容量瓶中足容,成為母液,貯于深棕色瓶?jī)?nèi),放冰箱中保存。測(cè)定時(shí)將母液稀釋10倍即得2%碘液,現(xiàn)配現(xiàn)用。
四、測(cè)定步驟
1.樣品準(zhǔn)各
(l)稻谷干燥后去去秋,用出糙機(jī)去殼。
。2)用小型精米機(jī)將糙米加工成標(biāo)一精米,加工需根據(jù)機(jī)型定時(shí)定量。
。3)用粉碎機(jī)將整精米(5一10克)粉碎成米粉,過(guò)60目篩,或用UD氣旋粉碎器加工成米粉。
。4)將待測(cè)米粉與已知直鏈淀粉含量的高、中、低標(biāo)準(zhǔn)米粉樣品同室存放兩天,使含水量保持一致(約12一13%)。
2.溶解樣品
。1)用毫克天平或萬(wàn)分之一分析天平準(zhǔn)確稱取試樣(包括標(biāo)樣)各100毫克置于100毫升容量瓶中。
。2)加入95%乙醉1毫升,緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)容量瓶,將米粉打濕。
。3)小必沿壁加入9毫升IN的氫氧化鈉溶液,不要擾亂樣品。
。4)將容量瓶置于容量瓶架上,放在沸騰的水浴鍋中煮10分鐘。(5)冷卻后定容至100毫升刻度處,搖動(dòng)容量瓶,使樣品溶液充分混合。
3.顯色
另取10.毫升容量瓶,先加人約50毫升蒸餾水,加試樣5毫升和IN醋酸1毫升,搖勻,再加0.2%碘液2毫升,定容至100毫升,充分搖動(dòng)混合,靜置20分鐘。
4.讀吸光系數(shù)
(1)將已預(yù)熱30分鐘的比色計(jì)的波長(zhǎng)置于620毫微米。
。2)取100毫升容量瓶一只,先加約50毫升蒸餾水再加入IN的酷酸1毫升和0.2%的碘液2毫升,然后定容,將此溶液作為空白,調(diào)“零”平11“100”.
。3)比色,逐一讀出樣品的吸光系數(shù)。
。4)用已知高、中、低直鏈淀粉含量標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光系數(shù)建立直線回歸方程:y二a十bx其中,了代表直鏈淀粉含道,x為吸光系數(shù)。將各樣品的吸光系數(shù)代人該公式,即可計(jì)算出未知樣品的直鏈淀粉含量。
五 討論
采用簡(jiǎn)易碘蘭比色法,必須在每次測(cè)定時(shí)加入高、中、低三個(gè)已知直鏈淀粉含量的標(biāo)誰(shuí)樣品,以便獲得可靠的直線回歸方程井檢查測(cè)定結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)樣品的直鏈淀粉含量可用Williams法測(cè)定,以便獲得精確的直鏈淀粉含量數(shù)值。測(cè)定所得的標(biāo)準(zhǔn)樣品可供簡(jiǎn)易碘蘭比色法每次測(cè)定時(shí)用。